El propósito principal de usar una solución de etanol al 75% en las encuestas de campo de Nosema es actuar como un fijador y conservante inmediato. Al recolectarla, la solución mata al espécimen de abeja melífera y detiene sus procesos fisiológicos. Esto estabiliza la muestra, previniendo la descomposición biológica durante el tiempo entre la visita al apiario y el análisis de laboratorio.
Al "pausar" eficazmente la degradación biológica, el etanol al 75% asegura que las esporas de Nosema permanezcan estructuralmente intactas durante semanas. Esto permite a los investigadores transportar muestras a largas distancias sin refrigeración, manteniendo la precisión de los diagnósticos microscópicos o moleculares posteriores.
La Mecánica de la Conservación de Muestras
Fijación Fisiológica Inmediata
Cuando se recolectan abejas melíferas para una encuesta, el ambiente interno de la abeja comienza a cambiar inmediatamente después de la muerte. El etanol al 75% fija el estado fisiológico de la abeja melífera en el momento exacto de la recolección.
Esta fijación rápida es crítica porque detiene los procesos metabólicos que de otro modo podrían alterar la muestra. Asegura que el espécimen analizado en el laboratorio sea biológicamente idéntico a la abeja en el campo.
Inhibición del Crecimiento Bacteriano
Sin un conservante, una abeja melífera muerta es susceptible a una rápida descomposición. La solución de etanol inhibe el crecimiento bacteriano y previene la putrefacción.
Esto es esencial porque el crecimiento excesivo de bacterias puede oscurecer las vistas microscópicas o degradar los marcadores de ADN específicos necesarios para la detección molecular.
Garantizar la Integridad de los Datos Durante el Transporte
Protección de la Estructura de las Esporas
La precisión de una encuesta de Nosema depende completamente de la capacidad de contar o detectar esporas. El etanol asegura que las esporas de Nosema permanezcan estructuralmente intactas.
Si las esporas se degradaran o desintegraran debido a una mala conservación, los recuentos de laboratorio serían artificialmente bajos, lo que llevaría a un diagnóstico falso de la salud de la colonia.
Extensión de la Ventana de Análisis
Las encuestas de campo a menudo se realizan en lugares remotos, lejos de las instalaciones de diagnóstico. El uso de etanol permite que las muestras permanezcan estables durante varias semanas durante el transporte.
Esta flexibilidad elimina la necesidad inmediata de logística de cadena de frío (como hielo seco o congeladores portátiles) directamente en el sitio de recolección.
Consideraciones Operativas
La Importancia de la Concentración
Es vital mantener la solución en el nivel de concentración del 75%.
Una concentración más baja puede no inhibir eficazmente el crecimiento bacteriano, lo que lleva a la degradación de la muestra. Por el contrario, aunque existen concentraciones más altas, el estándar del 75% está específicamente optimizado para equilibrar la penetración de los tejidos con la preservación de las esporas.
Integridad del Contenedor
Si bien el etanol es efectivo, es volátil. Como se señala en protocolos de muestreo más amplios (como los de los ácaros Varroa), se recomienda el uso de frascos de vidrio sellados para mantener la estabilidad química.
Si el contenedor no es hermético, el etanol puede evaporarse o filtrarse, lo que hace que la preservación sea ineficaz y provoque la pérdida de la muestra.
Garantizar Resultados de Laboratorio Confiables
Para asegurar que su encuesta de campo de Nosema arroje datos precisos y accionables, siga estas pautas basadas en sus necesidades logísticas:
- Si su enfoque principal es la Integridad de la Muestra: Asegúrese de que las abejas estén completamente sumergidas en la solución de etanol al 75% inmediatamente después de la recolección para prevenir cualquier descomposición inicial.
- Si su enfoque principal es la Logística de Transporte: Utilice contenedores sellados de alta calidad para evitar fugas o evaporación del etanol durante las semanas de tránsito.
- Si su enfoque principal es la Precisión del Diagnóstico: Confíe en este método tanto para el recuento microscópico como para la detección molecular, ya que el etanol preserva las estructuras biológicas necesarias para ambos.
La preservación química adecuada es el paso más importante para traducir las condiciones de campo en datos de laboratorio precisos.
Tabla Resumen:
| Característica | Función en Encuestas de Nosema | Beneficio para Investigadores |
|---|---|---|
| Fijación Inmediata | Detiene los procesos metabólicos y fisiológicos | Asegura que el espécimen coincida con la condición de campo |
| Inhibición Bacteriana | Previene la descomposición y la putrefacción | Mantiene marcadores microscópicos/de ADN claros |
| Preservación de Esporas | Mantiene intactas las estructuras de las esporas | Previene resultados falsos negativos o recuentos bajos |
| Estabilidad | Permite semanas de almacenamiento sin refrigeración | Simplifica el transporte desde apiarios remotos |
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Referencias
- Shane S. Klassen, Ernesto Guzmán‐Novoa. Nosema ceranae Infections in Honey Bees (Apis mellifera) Treated with Pre/Probiotics and Impacts on Colonies in the Field. DOI: 10.3390/vetsci8060107
Este artículo también se basa en información técnica de HonestBee Base de Conocimientos .
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